Klinická farmakologie a farmacie, 2004 (roč. 18), číslo 2

Klin Farmakol Farm 2004; 18:70-74

Možnosti rychlého průkazu ganciclovir rezistentních kmenů lidského cytomegaloviru (HCMV, CMV) u pacientů po transplantaci ledviny. Detekce bodových mutací v UL97 genu HCMV spojených s rezistencí vůči gancicloviru

Jiří Psohlavec¹, Miroslav Förstl¹, Jiří Horáček¹, Lenka Plíšková², Zbyněk Veselský³, Petr Fixa⁴

¹Ústav klinické mikrobiologie FN a LF UK Hradec Králové

²Ústav klinické biochemie a diagnostiky FN a LF UK Hradec Králové

³Urocentrum Praha, s.r.o

⁴Klinika gerontologická a metabolická, FN Hradec Králové

Klíčová slova: ganciclovir, HCMV, rezistence, UL97.

Dlouhodobá léčba cytomegalovirových infekcí (CMV, HCMV) u imunokompromitovaných pacientů, zahrnujících také příjemce transplantátu ledviny, ganciclovirem může vést k selhání léčby. Rezistence vůči gancicloviru je spojená s mutacemi v UL97 regionu virového genomu a/nebo s mutacemi ve virové DNA polymeráze (UL54). UL97 gen kóduje fosfotransferázu, která je nezbytná pro monofosforylaci gancicloviru. V naší studii jsme provedli analýzu UL97 genu klinických kmenů HCMV izolovaných z pacientů po prodělané transplantaci ledviny. Tyto klinické izoláty získané z třiceti vzorků od třiceti příjemců transplantované ledviny byly amplifikovány polymerázovou řetězovou reakcí a analyzovány metodou RFLP (metoda restrikční analýzy DNA). Studovány byly specifické bodové mutace spojené s rezistencí vůči gancicloviru v kodonech 460, 520, 591, 592, 594, 595, 599, 603 a 607. Nenalezli jsme žádné izoláty obsahující kteroukoli z výše zmíněných mutací. RFLP detekce bodových mutací v HCMV UL97 genu spojených s rezistencí vůči gancicloviru může být velkým přínosem pro časnou detekci rezistence vůči gancicloviru.

POSSIBILITIES OF RAPID DETECTION OF GANCICLOVIR-RESISTANCE HUMAN CYTOMEGALOVIRUS STRAINS IN PATIENTS AFTER KIDNEY TRANSPLANTATION. DETECTION OF POINT MUTATIONS IN THE HCMV UL97 GENE ASSOCIATED WITH GANCICLOVIR RESISTANCE

Long-term treatment of HCMV-infected immunocompromised patients, including kidney transplant recipients, with ganciclovir may result in failure of threrapy. Resistance to ganciclovir is related to mutations in the UL97 region of the viral genome and/or mutations in the viral DNA polymerase (UL54). UL97 gene encoding a phosphotransferase which is essential for monophosohorylation of ganciclovir. We analyzed UL97 gene of clinical HCMV strains isolated from renal transplant recipients. These clinical isolates obtained from 30 samples of thirty renal transplant recipients were amplified by polymerase chain reaction and analyzed by RFLP analysis. The specific point mutations conferring with ganciclovir resistance, including mutations in codons 460, 520, 591, 592, 594, 595, 599, 603 and 607, were investigated. We didn´t find any isolates carried any of these mutations. RFLP detection of point mutations in HCMV UL97 gene conferring with ganciclovir resistance may be a great contribution for early detection of ganciclovir resistance.

Plná verze článku