HPLC method with derivatisation for measuring isepamicin concentration in serum has been developed. The assay utilised extraction of isepamicin and tobramicin (IS) from serum on Amberlite XAD-2 columns. Derivatisation was performed with 1-fluor-2,4-dinitrobenzene for 1 hour in water bath at 80 °C. Chromatography was carried out using microbore column (1 × 150 mm) with reverse octadecyl phase and acetonitril/methanol/water/triethylamine 20:80:140:0,05 v/v/v/v, pH 3,8 as mobile phase. Separation was monitored at 365 nm. Linearity was 0-100 mg/ml, recovery 96-102 % and coefficient of variations about 5 % in tested concentrations (10, 25 and 100 mg/ml).

Trough and peak serum levels of isepamicin were measured during the treatment of 17 paediatric patients (8 were under 6 and 9 over 6 years). Mean age was 8,4±5 years and weight 26,7±13.4 kg. The dose of isepamicin 13,3±2,9 mg/kg was given in 30 minutes infusion once daily. Trough level was found 1,05±1,51 mg/l and peak level 35,4±19,5 mg/l, respectively.

Pharmacokinetic data were obtained by the aid of pharmacokinetic program MW-PHARM 3.30. Gentamicin population pharmacokinetic model for different age groups was used. In the group of children under 6 year the pharmacokinetic data were CL 2,41±1,71 ml/min/kg, Vd 0,49±0,12 l/kg, t1/2 3,03±2,12 hours, Cmax 28,77±19,46 mg/l, Cmin 0,58±0,75mg/l and tmax 0,51±0,24 hours. While in the group of children over 6 year were CL 1,50±1,45 ml/min/kg, Vd 0,32±0,08 l/kg, t1/2 3,83±1,97 hours, Cmax 41,23±23,81 mg/l, Cmin 1,47±1,92 mg/l and tmax 0,40±0,17 hours.

Implementation of HPLC method and pharmacokinetic modelling may reduce risk of isepamicin toxicity.

Nová metoda kapalinové chromatografie pro terapeutické monitorování isepamicinu

Na stanovení koncentrace isepamicinu v séru byla zavedena HPLC metoda s derivatizací. Isepamicin a tobramicin (vnitřní standard) se extrahovaly ze séra na kolonkách plněných Amberlitem XAD-2. Derivatizace se prováděla 1-fluor-2,4-dinitrobenzenem 1 hod na vodní lázni při teplotě 80 °C. Na chromatografickou analýzu se použila microbore kolona 1x150 mm s reversní octadecylovou fází, mobilní fáze byla složena následovně: acetonitril/methanol/voda/triethylamin 20:80:140:0,05 v/v/v/v, pH 3,8. Detekce se prováděla při 365 nm. Linearita metody byla testována v rozsahu 0-100 mg/ml, recovery bylo 96-102 % a variační koeficient okolo 5 % v koncentracích 10, 25 a 100 mg/l.

U 17 pediatrických pacientů (osm bylo mladších než šest let a devět starších) byla stanovována minimální a maximální koncentrace isepamicinu. Průměrný věk dětí byl 8,4±5 let a hmotnost 26,7±13,4 kg. Dávka 13,3±2,9 mg/kg isepamicinu se podávala ve 30 minutové infuzi jednou denně. Průměrné údolní koncentrace isepamicinu byly 1,05±1,5 mg/l a v píku 35,4±19,5 mg/l.

Farmakokinetické parametry se získaly pomocí farmakokinetického programu MW- PHARM 3.30. Jako model se použila populační farmakokinetika gentamicinu pro různé věkové skupiny. U dětí pod šest let jsme zjistili následující farmakokinetické parametry: CL 2,41±1,71 ml/min/kg, Vd 0,49±0,12 l/kg, t1/2 3,03±2,12 hod., Cmax 28,77±19,46 mg/l, Cmin 0,58±0,75mg/l a tmax 0,51±0,24 hodin. U dětí nad 6 let: CL 1,50±1,45 ml/min/ kg, Vd 0,32±0,087 l/kg, t1/2 3,83±1,97 hod.,Cmax 41,23±23,81 mg/l, Cmin 1,47±1,92 mg/l a tmax 0,40±0,17 hod.

Zavedení HPLC metody a farmakokinetické modelování může snížit riziko toxicity isepamicinu.

Zobrazit celý článek

Reference