Klinická farmakologie a farmacie, 2003 (roč. 17), číslo 1

Klin Farmakol Farm 2003; 17:

New high-performance liquid chromatographic method for therapeutic drug monitoring of isepamicin

Hana Brozmanová¹, Blanka Kořístková¹, Milan Grundmann¹, René Hrdlička²

¹Ústav klinické farmakologie FNsP a ZSF Ostravské univerzity, Ostrava

²Paediatric care unit, University Hospital and Medico-Social Faculty, University of Ostrava, Ostrava, Czech Republic

Klíčová slova: isepamicin, HPLC, TDM, farmakokinetika, děti.

HPLC method with derivatisation for measuring isepamicin concentration in serum was developed. The assay utilised extraction of isepamicin on Amberlite XAD-2 columns and derivatisation was performed with 1-fluor-2.4-dinitroflourbenzene. Chromatography was carried out using microbore column with reverse phase and mobile phase consisted of acetonitril/methanol/water/triethylamine 20:80:140:0.05. Isepamicin was given once daily and through and peak levels were measured in 17 paediatric patients Pharmacokinetic data were obtained by the aid of pharmacokinetic program MW- PHARM 3,30 using gentamicin population pharmacokinetic for different age groups as a model. Implementation HPLC method and pharmacokinetic modelling my reduce risk of isepamicin toxicity.

HPLC method with derivatisation for measuring isepamicin concentration in serum has been developed. The assay utilised extraction of isepamicin and tobramicin (IS) from serum on Amberlite XAD-2 columns. Derivatisation was performed with 1-fluor-2,4-dinitrobenzene for 1 hour in water bath at 80 °C. Chromatography was carried out using microbore column (1 × 150 mm) with reverse octadecyl phase and acetonitril/methanol/water/triethylamine 20:80:140:0,05 v/v/v/v, pH 3,8 as mobile phase. Separation was monitored at 365 nm. Linearity was 0-100 mg/ml, recovery 96-102 % and coefficient of variations about 5 % in tested concentrations (10, 25 and 100 mg/ml).

Trough and peak serum levels of isepamicin were measured during the treatment of 17 paediatric patients (8 were under 6 and 9 over 6 years). Mean age was 8,4±5 years and weight 26,7±13.4 kg. The dose of isepamicin 13,3±2,9 mg/kg was given in 30 minutes infusion once daily. Trough level was found 1,05±1,51 mg/l and peak level 35,4±19,5 mg/l, respectively.

Pharmacokinetic data were obtained by the aid of pharmacokinetic program MW-PHARM 3.30. Gentamicin population pharmacokinetic model for different age groups was used. In the group of children under 6 year the pharmacokinetic data were CL 2,41±1,71 ml/min/kg, Vd 0,49±0,12 l/kg, t1/2 3,03±2,12 hours, Cmax 28,77±19,46 mg/l, Cmin 0,58±0,75mg/l and tmax 0,51±0,24 hours. While in the group of children over 6 year were CL 1,50±1,45 ml/min/kg, Vd 0,32±0,08 l/kg, t1/2 3,83±1,97 hours, Cmax 41,23±23,81 mg/l, Cmin 1,47±1,92 mg/l and tmax 0,40±0,17 hours.

Implementation of HPLC method and pharmacokinetic modelling may reduce risk of isepamicin toxicity.

Nová metoda kapalinové chromatografie pro terapeutické monitorování isepamicinu

Na stanovení koncentrace isepamicinu v séru byla zavedena HPLC metoda s derivatizací. Isepamicin a tobramicin (vnitřní standard) se extrahovaly ze séra na kolonkách plněných Amberlitem XAD-2. Derivatizace se prováděla 1-fluor-2,4-dinitrobenzenem 1 hod na vodní lázni při teplotě 80 °C. Na chromatografickou analýzu se použila microbore kolona 1x150 mm s reversní octadecylovou fází, mobilní fáze byla složena následovně: acetonitril/methanol/voda/triethylamin 20:80:140:0,05 v/v/v/v, pH 3,8. Detekce se prováděla při 365 nm. Linearita metody byla testována v rozsahu 0-100 mg/ml, recovery bylo 96-102 % a variační koeficient okolo 5 % v koncentracích 10, 25 a 100 mg/l.

U 17 pediatrických pacientů (osm bylo mladších než šest let a devět starších) byla stanovována minimální a maximální koncentrace isepamicinu. Průměrný věk dětí byl 8,4±5 let a hmotnost 26,7±13,4 kg. Dávka 13,3±2,9 mg/kg isepamicinu se podávala ve 30 minutové infuzi jednou denně. Průměrné údolní koncentrace isepamicinu byly 1,05±1,5 mg/l a v píku 35,4±19,5 mg/l.

Farmakokinetické parametry se získaly pomocí farmakokinetického programu MW- PHARM 3.30. Jako model se použila populační farmakokinetika gentamicinu pro různé věkové skupiny. U dětí pod šest let jsme zjistili následující farmakokinetické parametry: CL 2,41±1,71 ml/min/kg, Vd 0,49±0,12 l/kg, t1/2 3,03±2,12 hod., Cmax 28,77±19,46 mg/l, Cmin 0,58±0,75mg/l a tmax 0,51±0,24 hodin. U dětí nad 6 let: CL 1,50±1,45 ml/min/ kg, Vd 0,32±0,087 l/kg, t1/2 3,83±1,97 hod.,Cmax 41,23±23,81 mg/l, Cmin 1,47±1,92 mg/l a tmax 0,40±0,17 hod.

Zavedení HPLC metody a farmakokinetické modelování může snížit riziko toxicity isepamicinu.

Plná verze článku